二、酶法(GK-GPO-POD比色法) | 《动脉粥样硬化》 |
二、酶法(GK-GPO-POD比色法)血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸,甘油在甘油激酶(GK)及ATP存在下,生成3-磷酸甘油,尔后,在磷酸甘油氧化酶(GPO)作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H2O2,H2O2与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶(POD)作用下,生成红色亚醌化合物(quinoneimine),比色(500nm),其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。 (一)手工测定法 1.试剂组成
*:一般采用商品试剂盒 图15-4 血清甘油三酯测定法(酶法)操作图 2.操作 按图15-4操作。 3.计算 血清TG浓度=ESA/EST×2.26(mmol/L) (二)生化分析仪检测 全自动生化分析仪测定操作(以CL-7200型为例)。 1.试剂 A液:GK,GPO,4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。 B液:POD,Lipase,ESPAS等。 标准液:甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。 2.上机参数
3.操作过程 4.计算 以△A=A2-A1并根据同样之标准或质控物计算,自动打印结果。 5.注意事项 ①试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。 ②试剂在有效期内2~8℃避光保存。 ③样本中甘油三酯含量超过11mmol/L需用生理盐水稀释后再测。
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