一、亮度法
1．原理 血清中游离脂肪酸经抽提到高密度铜试剂中，形成铜皂在上层溶剂中，再用二苯卡巴肼与铜显色，进行定量。 2．试剂组成
| 代号 |
种类 |
浓度 |
组成 |
贮存2～8℃ |
有效期 |
| R-1 |
抽提剂 |
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氯仿：庚烷：甲醇=5：5：1（V/V） |
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| R-2 |
缓冲液 |
33mmol/L |
KH2PO44.539g/L 100ml+Na2HPO4·2H2O5.983g/l 50ml调pH至6.4 |
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| R-3 |
铜贮液 |
500mmol/L |
Cu（NO3）2·3H2o 12.07g加H2O→100ml |
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| R-4 |
三乙醇胺 |
1.0mol/L |
三乙醇胺10ml，加水→100ml |
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| R-5 |
NaOH液 |
1mol/L |
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| R-6 |
铜试剂 |
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R-3 10ml+R-4 10ml+R-6 6ml
+H2O→100ml调pH至8.1 |
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| R-7 |
二苯卡
巴肼液 |
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二苯卡巴肼（乙醇）液（4g/L）10ml+R-4 0.1ml |
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临用前配制 |
| R-8 |
软脂酸标准贮存液 |
2mmol/L |
软脂酸51.2mg溶于100ml R-1液 |
冷藏 |
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| R-9 |
R-8的应用液 |
500μmol/L |
用R-1液稀释 |
冷藏 |
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3．操作 按图15-7操作。 4．计算 血清游离脂肪酸（μmol/L）=ESA/EST×500
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